微生物實驗玻璃器皿的清潔與滅菌

食品微生物檢測實驗室使用的玻璃器皿種類很多，應按不同的使用要求選擇不同的玻璃品種，大多數選用中興硬質玻璃（硼酸鹽玻璃），硬質玻璃能耐高熱、高壓、抗溫度急變性好、耐腐蝕性好，同時其中游離堿含量低，不會影響培養基的酸堿度。現將玻璃器皿的清潔與滅菌介紹如下。

一、玻璃器皿的清潔

1.新購進玻璃器皿的處理

新購進玻璃器皿上一般附有游離堿性物質，不能直接使用，應在2%鹽酸溶液中浸泡幾小時，把表面的堿性中和后，再用肥皂水或洗衣粉洗刷玻璃器皿的內外，然后用清水反復沖洗，來出去殘留的酸質，最后用蒸餾水沖洗干凈。

2.對反復使用的玻璃器皿的處理

常用的玻璃器皿，如平皿、試管、燒杯、燒瓶等，要先高壓滅菌（121℃、30min），趁熱倒掉容器中的廢棄物，以溫水沖凈，再加5%肥皂水煮沸5min，然后趁熱洗刷干凈，最后用蒸餾水沖洗干凈。

3.載玻片與蓋玻片

新買的載玻片與蓋玻片，以新購進的玻璃器皿處理方法清洗;用過載玻片的可以放入2%來蘇爾或5%石碳酸溶液中浸泡好后，取出后水洗，再用5%肥皂水煮沸20min，然后用毛刷蘸肥皂刷洗，最后用清水反復沖洗干凈。載玻片浸泡在95%的酒精1min，取出用軟布擦干，再放入盛蒸餾水的燒杯中浸泡5min以除去溶劑，烘干備用。

4.清潔劑的種類及使用

玻璃儀器常用的清潔劑是洗衣粉、去污粉、肥皂、洗液、有機溶劑等。對于可以用刷子直接刷洗的玻璃器皿，可用肥皂、洗衣粉、去污粉的水溶液直接刷洗。對于蒸餾瓶、容量瓶、移液管、滴定管等不容易用刷子刷的儀器，用洗液洗。洗液還可以用來洗刷子刷不下的頑固污漬和久置不用的器皿，洗刷頑固污漬時，要有足夠的浸泡時間。使洗液與儀器表面的污物充分發生化學作用；有機溶劑可以用來去除器皿表面的油脂，如甲苯、二甲苯、汽油等；有的也可利用能與水混合又易揮發的特點去除儀器上的水，如酒精等。

5.玻璃儀器的洗滌方法與要求

（1）人工清洗：帶干凈的手套或洗凈手，用清水沖洗器皿；選擇合適的潔凈劑洗刷或浸泡；先用自來水沖洗，再用蒸餾水順壁沖洗充分震蕩，直至玻璃器皿上掛不住水珠，用指示劑檢查為中性。

（2）超聲波清洗：加入清洗劑，利用清洗劑的化學作用和超聲波的物理作用，達到對玻璃器皿的成分清洗的目的，超聲波在30℃~40℃時凈化效果較好，在實際工作中一般采用40℃~60℃的工作溫度。用清洗劑洗刷完后，再用清水洗，直至達到玻璃器皿清洗要求。

6.玻璃器皿洗刷應注意的問題

含油脂（石蠟油、凡士林）的玻璃器皿要單獨清洗，洗刷前盡量先去油，單獨高壓滅菌后，趁熱倒掉污物，然后將玻璃器皿倒置于鋪有粗吸水紙的鐵絲筐內，放于100℃烘箱內0.5h，取出后再放入5%碳酸氫鈉水中煮兩次，然后用肥皂水刷洗干凈，最后用蒸餾水沖洗干凈。

用來做熒光分析的玻璃器皿儀器應避免用洗衣粉洗，因洗衣粉中的熒光增白劑會影響實驗結果。

二、玻璃器皿的包扎

玻璃器皿在滅菌前，應用紙或金屬桶等包裹，防止消毒滅菌后，被外界的雜菌所污染。

1.燒杯、三角瓶、試管等

可用做好的合適的棉塞塞好，外面再用紙和細繩包扎一下，以防棉塞掉下。燒杯可用紙和繩包扎即可。燒杯、三角瓶和試管包扎見下圖。

2.培養皿

可用牛皮紙或雙層報紙單個或數個包成一包，也可直接放入特制的培養皿滅菌金屬桶內，加蓋滅菌。用牛皮紙或報紙包扎的過程如下圖。

（1）將12個玻璃培養皿按圖2~4個堆放在牛皮紙或雙層報紙（4開，39cm×54cm）上，兩頭擰緊。

（2）用雙手拇指和食指將紙邊裹在平皿堆表面，同時用雙手的無名指和小指擠緊平板。將平皿堆向前滾，順勢將紙緊緊包裹在平皿堆的外面，整個推進的過程中雙手無名指和小指都要擠緊平板。包裹的松緊程度直接決定最終的包扎質量。

（3）當紙全部包裹在平板堆表面后，將平板堆數值放在桌面上。將平板堆兩頭的紙依次疊好別緊。

3.移液管

在包裝前先用長針等在上口處塞少量的棉花（勿用脫脂棉），既可防止吸取液體時，液體被吸出造成污染，又可對吹入吸管的空氣起一個過濾作用。塞入的棉花的量要適宜，距管口約0.5cm左右，棉花的長度約1cm~1.5cm。棉花要塞得松緊適度，吹時既能通氣又不能使棉花下滑。移液管可用紙分別卷包，也可用多支包成一束或裝入金屬桶進行滅菌。

單支移液管的包裝可先將牛皮紙（或報紙）剪成約5cm的長紙條，再將移液管的尖duan放在紙的一段，約成45°角，折疊包好尖duan，一手拿管身，一手壓緊管和紙，在桌上向前搓滾，使紙成螺旋狀把管包起來，上端剩余的紙條折疊后打結即可。見下圖。

三、玻璃器皿的滅菌

1.干熱滅菌

玻璃器皿干燥包裝后可在電熱干燥箱內進行干熱滅菌，加熱160℃~180℃，維持2h。包裝放置在干燥箱內，不要和箱壁接觸，打開電源后，先把箱頂部的通氣孔打開一點，讓濕空氣逸出，當箱內溫度達到100℃后，關閉通氣孔。調節溫度控制旋鈕到設定的溫度，升溫至所設定的溫度時，維持1h~2h進行滅菌。滅菌完成后，關掉電源，冷卻到60℃時，再打開箱門。溫度控制旋鈕歸位，并打開頂部通氣孔。滅菌后的器皿，要1周內用完。

2.高壓蒸汽滅菌

在高壓蒸汽滅菌器內進行，是一種普遍的、有效的滅菌方法。

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